• 黃曲黴毒素B1檢測免疫親和柱
<返回列表

【概要】
黃曲黴毒素(Aflatoxin)是黃曲黴、寄生曲黴等真菌產生的次級代謝產物,被世界衛生組織的癌症研究機構劃分為1類致癌物,同時又是一種毒性極強的劇毒物質,廣泛存在於各種食物中。玉米,花生,大米,小麥等穀物及其副產品是黃曲黴毒素的主要來源,同時飼料中的黃曲黴毒素B 1 經過動物代謝後產生的黃曲黴毒素M 1 仍然具有很強的毒性和致癌性,也廣泛存在牛奶,血液,組織等食品中。黃曲黴毒素作為肝癌的三大誘因之一,也是誘發胃癌,腸癌等疾病的主要原因之一,對人類的健康構成很大威脅。世界各國對食品,飼料中的黃曲黴毒素都有嚴格的限量標準。
【適用範圍及性能】
用於定性、定量檢測穀物、副食品、酒類等食品和飼料等樣本中的黃曲黴毒素總量 B 1 時的樣品前處理。
柱容量:≥200ng
回收率:≥90%
【試驗原理】
本產品的測定的基礎是抗原抗體反應,黃曲黴毒素 B 1 單克隆抗體連接在柱內凝膠上,樣品中的黃曲黴毒素 B 1 經過提
取、過濾、稀釋,然後將樣品提取液緩慢的通過黃曲黴毒素B1免疫親和層析柱,在免疫親和柱內,毒素與抗體結合,之後洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他物質。用甲醇洗脫黃曲黴毒素 B 1 ,然後注入到分析儀器中用於檢測。
【包裝組成】
根據不同規格,每一個盒中包含 5-25 支黃曲黴毒素免疫親和層析柱及 1 份說明書。
【需要而未提供的設備及試劑】
設備:
┅┅高速均質器或組織勻漿機
┅┅粉碎機
┅┅200ml/50ml 量筒
┅┅天平:感量 0.1g
┅┅微量移液器:單道 100ml~1000ml
┅┅槽紋濾紙(折疊快速定性或定量濾紙)
┅┅玻璃微纖維濾紙(1.5mm 孔徑)
┅┅50ml 漏鬥
┅┅一次性玻璃試管
┅┅泵流操作架(包括空氣泵,不同容積的玻璃注射器等)
試劑:
┅┅甲醇(色譜級)
┅┅蒸餾水或去離子水
┅┅pH7.0 磷酸鹽緩衝溶液(PBS):稱取 8.0g 氯化鈉,1.2g
磷酸氫二鈉,0.2g 磷酸二氫鉀,0.2g 氯化鉀,用 990mL 純
水溶解,然後用濃鹽酸調節 pH 值至 7.0,最後用純水稀釋至
1000mL
┅┅吐溫-20/PBS 溶液(0.1%):取 1mL 吐溫-20,加入 PBS緩衝溶液並定容至 1000mL
【試劑配製】
樣品提取液:根據不同的樣品配置不同濃度的甲醇水溶液,作為樣品提取液。
【樣本處理步驟】
(一)花生,玉米,大米,小麥及其製品,植物油脂和飼料
┅┅取 25g 粉碎的樣品(植物油脂直接取樣,無需處理)與125mL 甲醇-水(7:3)溶液混合;
┅┅加入 5.0g 氯化鈉以均質器高速攪拌,提取 2 分鍾;
┅┅4000r/min 離心 5min 或用槽紋濾紙過濾;
┅┅取 15mL 濾液並加入 30mL 水稀釋,用玻璃微纖維濾紙過濾,取稀釋後液體待測;
┅┅將免疫親和柱連接於 20.0mL 玻璃注射器下。準確移取15.0mL 樣品提取液注入玻璃注射器;
┅┅將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約6mL/min 流速緩慢通過免疫親和柱,直至 2~3mL 空氣通過柱體;
┅┅以 10.0mL 水淋洗柱子 2 次,棄去全部流出液,並使2mL~3mL 空氣通過柱體;
┅┅準確加入 1.0mL 色譜級甲醇洗脫,流速為 1 mL/min~2mL/min,收集全部洗脫液於玻璃試管中,供檢測用。
(二)醬油
┅┅取 50g 試樣與 100mL 甲醇-水(8:2)溶液混合;
┅┅加入 2.5g 氯化鈉以均質器高速攪拌,提取 1 分鍾;
┅┅4000r/min 離心 5min 或用槽紋濾紙過濾;
┅┅取 10mL 濾液並加入 40mL 水稀釋,用玻璃微纖維濾紙過濾
┅┅取稀釋後液體待測;
┅┅將免疫親和柱連接於 10.0mL 玻璃注射器下。準確移取10.0mL 樣品提取液注入玻璃注射器;
┅┅將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約6mL/min 流速緩慢通過免疫親和柱,直至 2~3mL 空氣通過柱體;
┅┅用 10.0mL 0.1%的吐溫/PBS 清洗,再以 10.0mL 水淋洗柱子2次,棄去全部流出液,並使2mL~3mL空氣通過柱體;
┅┅準確加入1.0mL 色譜級甲醇洗脫,流速為1 mL/min~2mL/min,收集全部洗脫液於玻璃試管中,供檢測用。
(三)食醋
┅┅取5g 試樣,加入1.0g 氯化鈉;
┅┅以pH7.0 磷酸鹽緩衝溶液稀釋定容至 25.0mL;
┅┅4000r/min 離心 5min 或用槽紋濾紙過濾;
┅┅取10mL 濾液並加入10mL 水稀釋,用玻璃微纖維濾紙過濾
┅┅取稀釋後液體待測。
┅┅將免疫親和柱連接於10.0mL 玻璃注射器下。準確移取10.0mL 樣品提取液注入玻璃注射器;
┅┅將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約6mL/min 流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL 空氣通過柱體;
┅┅用10.0mL 0.1%的吐溫/PBS 清洗,再以10.0mL 水淋洗柱子2次,棄去全部流出液,並使2mL~3mL空氣通過柱體;
┅┅準確加入1.0mL 色譜級甲醇洗脫,流速為1 mL/min~2mL/min,收集全部洗脫液於玻璃試管中,供檢測用。
【結果判定】
經免疫親和柱淨化後,收集到的甲醇洗脫液可直接使用熒光計或者HPLC檢測,也可使用薄層色譜或者酶聯免疫試劑盒進行檢測。收集到的1mL洗脫液中的黃曲黴毒素B1含量相當於1g樣品中黃曲黴毒素B1 含量。
【高效液相參考譜圖】
【注意事項】
┅┅黃曲黴毒素危害極大,應戴手套操作。
┅┅使用過的玻璃容器及黃曲黴毒素溶液最好用 5%濃度次氯
酸鈉溶液浸泡過夜。
┅┅不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
【貯藏條件及保存期】
貯藏條件:親和柱可於常溫保存,2-8℃儲存可延長有效期,
不可凍存
保存期:該產品有效期為12 個月。





更多產品

全部產品
掃描二維碼分享到微信
確 認

Copyright © 2016-2017 www.lxzxfwl.com 濟南AG8亚游官网生物科技有限公司 版權所有